Grazas por visitar Nature.com.A versión do navegador que estás a usar ten soporte CSS limitado.Para obter a mellor experiencia, recomendámosche que utilices un navegador actualizado (ou que desactives o modo de compatibilidade en Internet Explorer).Mentres tanto, para garantir a asistencia continua, renderizaremos o sitio sen estilos e JavaScript.
O trastorno de estrés postraumático (TEPT) caracterízase por un deterioro na capacidade de neutralizar as respostas de medo ás sinais asociadas ao trauma.Os estudos en humanos e animais sinalan diferenzas na implicación de certas áreas da cortiza frontal como mediadores clave que determinan o éxito da supresión do medo, pero a interacción dos circuítos neuronais que determinan a implicación diferencial destas áreas non está clara.Para comprender mellor como as diferenzas individuais na lembranza da extinción se reflicten nas diferenzas na actividade do circuíto neuronal, etiquetamos as proxeccións do córtex sublímbico (IL) da rata con trazadores retrógrados e comparamos as proxeccións neuronais dentro e fóra das neuronas de proxección de IL.Analizamos estes datos, agrupándoos segundo o grao de conservación da memoria esvaecida en ratas.Descubrimos que nas células que proxectan IL, as neuronas do paratálamo posterior mostraron unha actividade aumentada nas ratas, que mostraban un bo recordo da extinción.Ademais das células que proxectan IL, observouse un aumento da actividade de Fos en áreas seleccionadas do claustro da rata e do hipocampo ventral con boa resolución.Os nosos resultados indican que as diferenzas na lembranza da extinción están asociadas con patróns específicos de actividade neuronal dentro e fóra das proxeccións de IL.
O condicionamento do medo ocorre cando un estímulo neutro está asociado a un estímulo aversivo incondicionado (UCS), de forma que o estímulo orixinalmente neutro, agora o estímulo condicionado (CS), provoca unha resposta de medo condicionada (CR) en ausencia do SCU.A reversión do medo condicionado foi impulsada pola diminución da CR a CS debido á presentación repetida de CS en ausencia de UCS1.Investigacións anteriores demostraron que o trastorno de estrés postraumático (TEPT) está asociado coa incapacidade de lembrar a extinción das respostas de medo condicionadas2.A pedra angular da terapia cognitivo-conductual para o tratamento do trastorno de estrés postraumático é a terapia de exposición baseada na extinción das respostas de medo aprendidas3,4.Polo tanto, os estudos das diferenzas individuais no medo á extinción dos roedores e nos mecanismos neuronais subxacentes poden axudar a dilucidar as diferenzas nas respostas humanas ao trauma e ao tratamento do trastorno de estrés postraumático.A pesar dos avances na identificación dos mecanismos neuronais que distinguen as memorias de extinción exitosas das non exitosas, queda moito por descubrir.
Os modelos de roedores son útiles neste traballo porque hai diferenzas individuais significativas na lembranza da extinción de roedores7,8,9,10.Traballos previos que investigan os mecanismos neuronais da extinción do medo a nivel poboacional demostraron que a activación da cortiza infralíbica (IL) é necesaria para a recuperación da extinción (ref. 11, 12, 13, pero ver 14), e algúns estudos atoparon unha diminución da A actividade dos roedores en IL mostra mala memoria sobre a extinción en comparación cos roedores, que son moi temidos.Non obstante, non están claros os mecanismos polos que as IL están implicadas de forma diferenciada para facilitar a eliminación do medo nos roedores en comparación cos que mostran unha extinción máis débil.
Unha posibilidade é que as diferenzas na memoria de extinción do medo entre individuos sexan o resultado da activación diferencial de ILs aferentes específicos.Estudos anatómicos18 demostraron que varias áreas corticais e subcorticais do cerebro envían proxeccións densas a IL, que á súa vez envía proxeccións eferentes a moitas áreas do cerebro.Estudos a nivel poboacional demostraron que as proxeccións de IL á amígdala son importantes para adquirir a extinción do medo20,21,22 e a entrada de IL da amígdala basolateral (BLA) tamén se asocia coa aprendizaxe da extinción.Hai menos investigacións sobre a implicación dos circuítos centrados na IL na lembranza da extinción, aínda que traballos recentes suxiren que tanto o hipocampo ventral como o dorsal están implicados na predición de IL.As proxeccións eferentes da IL ao núcleo recombinante do tálamo, ao parecer, tamén participan na memoria da extinción do medo.
Estes estudos anteriores están comezando a debuxar unha imaxe da interacción dos circuítos neuronais implicados na lembranza da extinción, pero hai moi poucos datos sobre se a actividade nos circuítos neuronais centrados na IL inflúe nas diferenzas individuais na lembranza da extinción.Aquí, buscamos determinar se as diferenzas na memoria de extinción do medo entre individuos están asociadas con cambios na activación da entrada de IL en rexións cerebrais específicas.En particular, avaliamos a activación das células aferentes IL no núcleo paraventricular do tálamo (PVT), clavícula (CLA), BLA e hipocampo ventral (vHPC).Estas rexións cerebrais escolléronse tanto porque envían proxeccións densas a IL como porque hai motivos para sospeitar que poden estar implicadas na expresión da extinción do medo 18 .Por exemplo, un estudo recente mostrou que a PVT, unha rexión coñecida por estar implicada na adquisición e reprodución do medo, é necesaria para a reprodución por extinción.Ademais, estudos anteriores mostraron un aumento da actividade da amígdala basal e do vHPC en ratas que expresan memoria de extinción.Finalmente, a análise do claustro é máis exploratoria dado que ningún dos traballos anteriores avaliou o seu papel na extinción.Porén, traballos recentes suxiren que xoga un papel no condicionamento contextual do medo29.
Os trazadores retrógrados conxugados con GFP virais foron inxectados na IL de ratas antes das probas de comportamento, e a actividade de Fos nos aferentes de IL foi medida durante a repetición da extinción, o recordo do medo e en ratas non sometidas a probas de comportamento.Os nosos resultados indican que as proxeccións do tálamo paraventricular posterior a IL mostran unha actividade aumentada en ratas que recordan con éxito a extinción.Ademais das predicións de IL, a actividade neural en certas áreas da clavícula e do hipocampo ventral aumentou en ratas que regresaron ben.Os nosos resultados mostran que os patróns de actividade neuronal intrínseca e extrínseca proxectadas sobre IL están asociados con diferenzas individuais na memoria de extinción do medo.
Como suxeitos utilizáronse cincuenta e catro ratas Sprague-Dawley machos adultos (300-325 g á chegada) obtidas de Charles River Laboratories (Raleigh, NC).As ratas aloxáronse en parellas, con acceso libre á comida e á auga, nun ciclo de luz/escuridade de 12 horas (as luces acesas ás 7 da mañá).Para estes experimentos utilizáronse dous grupos de ratas (n = 28 e n = 26).Despois da exclusión da morte, o erro cirúrxico, a falta de expresión da GFP no sitio de destino, a mala calidade do tecido e os problemas de comportamento (explicados en Métodos), o grupo de recuperación da extinción incluíu 21 ratas e o grupo de recuperación do medo incluíu 7 ratas, gaiolas da casa.o grupo estaba formado por 7 ratas (incluíronse 35 ratas na análise final).Todos os procedementos foron aprobados polo Comité Institucional de Coidado e Uso de Animais da Universidade de Stony Brook e estaban de acordo coas Directrices ARRIVE (https://arriveguidelines.org) e as Directrices do NIH para o Coidado e Uso de Animais de Laboratorio.
As ratas foron tratadas dous días antes da cirurxía.As ratas foron anestesiadas con ketamina (87 mg/kg) e xilazina (10 mg/kg), colocadas nun aparello estereotáxico (Stoelting, Woodale, IL) e recibiron inxeccións unilaterais de AAVrg-CAG-GFP (Addgene, 30) en IL.(equilibrar as inxeccións esquerda e dereita).Para a inxección, baixouse no seu lugar unha cánula de calibre 22 (AP: + 3,00, ML: ± 0,6, DV: - 5,2).Insira unha cánula interna de 28G (conectada a unha bomba de infusión mediante tubo de PE 20) na cánula guía para administrar 0,6 µl de virus a unha velocidade de 0,15 µl por minuto e déixase no seu lugar durante 5 minutos despois de que a infusión estea intacta..Despois da sutura, as ratas foron inxectadas con meloxicam (1 mg/kg) e tan pronto como puideron moverse foron devoltas ás súas gaiolas.As ratas mantivéronse nas súas gaiolas durante unhas 7 semanas para permitir a recuperación do virus e o transporte retrógrado.Tres ratas morreron baixo anestesia, o que resultou en que 51 ratas (94%) se recuperaron con éxito da cirurxía.
Todos os procedementos realizáronse en cámaras de acondicionamento de 32 cm × 25 cm × 21 cm (Clever Systems Inc., Reston, VA) aloxadas en caixas de illamento acústico de 45,7 cm × 43,2 cm × 43,2 cm (Clever Sys. . Inc.).).Durante as sesións de aprendizaxe e lembranza de extinción, cambiouse o contexto para que fose diferente do contexto condicional orixinal.A condición A (xeración do medo) incluía lámpadas domésticas incandescentes de 28 voltios (Chicago Micro Lighting, Reino Unido), mentres que a condición B (adestramento de extinción, proba de recuperación de extinción e proba de recuperación do medo) incluía lámpadas LED infravermellos (Univivi IR Illuminator, Shenzhen) ., China;U48R).Ademais, mentres que o Context A ten un chan de lamas antivibración con paredes de aceiro inoxidable e plexiglás, o Contexto B contén insercións metálicas pintadas colocadas no chan e nas paredes.A forma do Contexto B tamén se modificou colocando unha inserción metálica curva de 33,5 cm x 21,3 cm nunha cámara de acondicionamento estándar.Ademais, no contexto A as cámaras foron limpadas con ácido acético ao 5%, mentres que no contexto B as cámaras foron limpadas con hidróxido de amonio ao 5%.Finalmente, no contexto B, as ratas foron levadas á sala de probas en baldes en lugar de ser enroladas en gaiolas en carros.As sesións de comportamento graváronse coa cámara superior e o sinal de vídeo de cada cámara introduciuse nun software (FreezeScan 2.00, Clever Sys. Inc., Reston, VA) que avaliou o comportamento do desvanecemento en función dos cambios de píxeles.Os parámetros elixíronse de xeito que o comportamento do desvanecemento estimado polo ordenador coincida estreitamente co comportamento dos observadores adestrados estimado manualmente.Un valor que indica a porcentaxe de tempo de conxelación acumulado nun intervalo de 30 segundos.
Todos os programas de comportamento realízanse durante a parte clara do ciclo luz/escuro.As ratas foron tratadas 5 días antes do inicio dos procedementos de comportamento e transportadas á sala de comportamento durante os últimos tres días de tratamento.O primeiro día de probas de comportamento, un grupo de ratas de recordo de extinción foron colocadas nun reflexo condicionado polo medo, despois colocáronse no contexto A, cun período de aclimatación sen estimular de 6 minutos, e despois recibiu ambas combinacións de 4 kHz, 76 dB, 30 s. .ton e terminación global, 1,0 mA, kick 1 s (2 min ITI).Para todos os adestramentos de comportamento, as ratas foron devoltas ás gaiolas 2 minutos despois da última presentación do estímulo.Ao día seguinte, as ratas do grupo de recuperación de extinción foron colocadas na sala de contexto B e realizaron 20 presentacións sonoras (2 min ITI) como adestramento de extinción despois dun período de habituación de 6 min.Ao día seguinte, as ratas do grupo de reprodución en extinción expuxéronse a 4 tonos no contexto B despois dun período de aclimatación de 6 minutos como proba de extinción.As ratas do grupo de memoria de extinción foron perfundidas 60 minutos despois da sesión de comportamento.Un grupo de ratas control que evocaban recordos de medo foron sometidas ao mesmo procedemento o primeiro día da resposta condicionada ao medo no contexto A. Corenta e oito horas despois, as ratas foron colocadas na sala de contexto B e sometidas a 4 presentacións de audio (2- minuto ITI) como proba de memoria.medo despois dun período de aclimatación de 6 minutos.As ratas foron perfundidas 60 minutos despois da sesión de comportamento.Un grupo de ratas control domésticos permaneceron nas súas gaiolas durante todo o experimento e foron perfundidas o mesmo día que as ratas experimentais.Cada un dos dous grupos de ratas dividiuse en dúas series e equilibrouse o número de animais de cada grupo entre as series.Unha rata do grupo de recordos de medo foi excluída da análise porque non mostrou sinais de condicionamento do medo (conxelación menos do 15% do tempo durante a proba de recordos de medo).Vexa a Figura 2A para ver un diagrama da liña de tempo do comportamento.
As ratas foron sobredosificadas con solución Fatal Plus (100 mg/kg), despois perfundíronse con PBS 10% xeado seguido de formalina tamponada ao 10%.O cerebro foi eliminado e almacenado nunha solución de sacarosa ao 30% en formalina a 4 ° C durante aproximadamente 1 semana.Despois conxelouse o cerebro e cortóuse nun criostato de 40 µm de espesor.As seccións almacenáronse secuencialmente en PBS ao 10% a 4 °C.Despois, realizouse a inmunofluorescencia en seccións flotantes que conteñen a rexión cerebral de interese.As seccións laváronse 3 veces en PBS ao 10% durante 5 minutos cada unha.A continuación, as seccións incubáronse nunha solución de bloqueo ao 5% de soro de cabra normal durante 2 horas a temperatura ambiente, e despois laváronse tres veces máis durante 5 minutos cada unha en PBS ao 10%.Despois, as seccións incubáronse durante a noite a 4 °C en anticorpos primarios (c-Fos, #2250, 1:500) (Cell Signaling, Danvers, MA) diluídos en BSA ao 1% en PBS ao 10%.Ao día seguinte, laváronse as seccións en PBS ao 10% durante 30 minutos a 4 °C, despois 3 veces durante 5 minutos en PBS ao 10% e incubáronse cun anticorpo secundario (Alexa Fluor 594 anti-coello de cabra, conxugado vermello, 1:500). ).) (Invitrogen, Carlsbad, CA) a temperatura ambiente durante 2 horas.Despois de 3 lavados adicionais en PBS 10% durante 5 minutos, as seccións colocáronse en portas de vidro e seláronse con Fluoromount-G (Invitrogen).Vexa imaxes representativas da inmunotinción na figura 3G.
Utilizouse un microscopio fluorescente que utilizaba unha cámara dixital Infinity3 (Lumenera, Ottawa, Ontario, Canadá) e un motor de luz (Lumencor, Beaverton, OR) conectado a un microscopio Zeiss para adquirir imaxes de cada rexión do cerebro de interese, incluíndo seccións que conteñen IL sen inmunofluorescencia.realízase para confirmar a correcta colocación do lugar de inxección.As imaxes utilizadas para o reconto de células obtivéronse cun aumento de 20x.Para cada sección de tecido, tome unha imaxe cun filtro que permita a visualización de GFP e unha imaxe cun filtro que permita a visualización do conxugado vermello Alexa Fluor no anticorpo secundario, e utilizouse un software de imaxe (Infinity Analyze, versión 3) para a imaxe. superposición.Adquire todas as imaxes de todas as áreas do cerebro usando a mesma configuración de tempo de exposición e ganancia.Seis ratas foron excluídas da análise porque a principal transmisión do virus produciuse fóra da IL (taxa de éxito do 88%).Excluíronse oito ratas máis porque, a pesar de que o virus atacaba a IL, non mostraban suficiente expresión de GFP en todas as rexións cerebrais diana de interese.Ademais, unha rata foi excluída debido á mala calidade do tecido.
Axusta o brillo e o contraste para reducir o ruído de fondo na imaxe J (NIH) usando o mesmo procedemento para cada imaxe.Os recontos de células para o total de células marcadas retrógradas, o total de células marcadas con Fos e o total de células dobre marcadas foron realizados manualmente polo experimentador, que non identificou os animais, mediante o complemento do citómetro Image J.Os recontos de células normalizáronse a células/mm2.Para analizar a expresión de Fos nas células que proxectan IL, normalizouse o número de células con dobre etiquetado ao número total de células marcadas con retrógrado.Para a análise mBLA, mvHPC e pvHPC, os recontos de células de varias imaxes 20x sumáronse e normalizáronse a células/mm2.Para a análise do resto das rexións do cerebro, analizouse unha imaxe de 20x ou unha parte dunha imaxe de 20x e normalizouse a células/mm2.A análise vHPC incluíu as rexións CA1, CA2 e vHPC subdominantes.A figura 1 mostra as rexións cerebrais analizadas con imaxes que delinean o bordo anterior-posterior do plano.
Abreviaturas e localización das rexións cerebrais de interese.Explicación das abreviaturas e localizacións das rexións do cerebro dadas no manuscrito.Mapa cerebral de dominio público tomado de Swanson (2004) Brain Map: Structure of the Rat Brain, 3ª edición, baixo a licenza Creative Commons Attribution-NonComercial 4.0 International License (https://creativecommons.org/licenses/by-nc/ 4.0) ./), dispoñible para descargar en https://larrywswanson.com.
A porcentaxe de tempo de conxelación promedia nun período de reprodución de tons de 30 segundos, excluíndo os intervalos intermedios.As taxas de lembranza de extinción calculáronse expresando a porcentaxe de tempo de desvanecemento durante a recuperación de extinción como porcentaxe de esvaecemento durante os primeiros catro ensaios de adestramento de extinción (esvaecemento durante catro tons de recuperación de extinción/esvaecemento durante os catro primeiros tons de adestramento de extinción*100).As puntuacións baixas indican unha boa memoria de fade, e as altas indican unha mala memoria de fade.As ratas clasificáronse segundo a puntuación de recordo de extinción, con ratas do terzo superior da puntuación de recordo de extinción clasificadas como "ratas de extinción malas" e as ratas dos últimos dous terzos da puntuación de recordo de extinción clasificáronse como "boas".Ratos que desaparecen da memoria.
As probas non paramétricas utilízanse porque os datos a miúdo violan as suposicións sobre a distribución normal e/ou a homoxeneidade das varianzas.Utilizouse a correlación de rangos de Spearman para determinar se había unha asociación significativa entre as puntuacións de recordo de extinción e os marcadores Fos e os marcadores duais nas rexións cerebrais de interese en todas as ratas sometidas á proba de lembranza de extinción.Utilizouse a proba U de Mann-Whitney para determinar se había unha diferenza entre dous grupos independentes.A proba de Kruskal-Wallis úsase para determinar se 2 ou máis grupos difieren entre si, e a proba de comparación múltiple de Dunn úsase cando a estatística de Kruskal-Wallis é significativa.Avaliouse o esvaecemento durante a aprendizaxe da extinción mediante a análise de varianza de medidas repetidas co grupo como factor intersuxeito e a proba como factor intrasuxeito. Os resultados consideráronse significativos cando p < 0,05 para todas as probas estatísticas. Os resultados consideráronse significativos cando p < 0,05 para todas as probas estatísticas. Результаты считались значимыми при p < 0,05 для всех статистических тестов. Os resultados consideráronse significativos en p < 0,05 para todas as probas estatísticas.当所有统计检验的p < 0,05 时，结果被认为是显着的。当所有统计检验的p < 0,05 时，结果被认为是显着的。 Результаты считались значимыми при p < 0,05 для всех статистических тестов. Os resultados consideráronse significativos en p < 0,05 para todas as probas estatísticas.
A Figura 2 mostra a liña de tempo experimental (Figura 2A) e a distribución de frecuencias de todas as ratas sometidas a extinción (Figura 2B). As ratas dos grupos de extinción boas e malas diferían significativamente nestas puntuacións calculadas de lembranza da extinción (U = 0, p <0,001) (Fig. 2C). As ratas dos grupos de extinción boas e malas diferían significativamente nestas puntuacións calculadas de lembranza da extinción (U = 0, p <0,001) (Fig. 2C). Крысы в ​​​​группах с хорошим и плохим угашением значительно различались по этим раснспим расним различались минания угашения (U = 0, p <0,001) (рис. 2C). As ratas dos grupos de extinción boas e malas diferían significativamente nestas taxas calculadas de recordo de extinción (U=0, p<0,001) (Figura 2C).在这些计算的灭绝回忆分数中，良好和不良灭绝组中的大鼠存在显着存在显着分数中，良好和不良灭绝组中的大鼠存在显着存在显着存在显着存在显着弈（（（（ 0.00 2C). U = 0，p <0,001）（图2C， В этих рассчитанных показателях припоминания угашения крысы в ​​​​группах с хорошим и хорошим хорошим хорошим хорошим и пломинания крысы ьно различались (U = 0, p <0,001) (рис. 2C). Nestas taxas de recordo de extinción calculadas, as ratas dos grupos de extinción boas e malas diferían significativamente (U = 0, p <0,001) (Figura 2C).Non houbo diferenzas significativas no tempo de conxelación entre os grupos con boa extinción, mala extinción e recordo do medo durante o período base da sesión reflexa condicionada por medo (X2 (2) = 2,746, p = 0,253) (Figura 2D).Ademais, durante a presentación do primeiro ton do reflexo condicionado do medo, non houbo diferenza significativa no tempo de conxelación entre os grupos con boa extinción, mala extinción e recordo do medo (X2(2) = 1,107, p = 0,575), xa que así como durante o medo durante os segundos tons.Durante a sesión de acondicionamento, houbo unha diferenza significativa no tempo de conxelación entre os grupos con boa extinción, mala extinción e recordo do medo (X2 (2) = 2,214, p = 0,331) (Figura 2D).Tampouco houbo diferenzas significativas no tempo de desvanecemento entre os grupos de extinción bos e pobres durante o período de adestramento de extinción de referencia (U = 45,00, p = 0,799) (Figura 2D). A continuación, houbo un efecto principal significativo do bloque de proba (5 tons por bloque) no tempo de conxelación durante a sesión de adestramento de extinción (F (2,884, 54,80) = 8,331, p <0,001), o que indica que se produciu a aprendizaxe da extinción (Fig. 2D). ). A continuación, houbo un efecto principal significativo do bloque de proba (5 tons por bloque) no tempo de conxelación durante a sesión de adestramento de extinción (F (2,884, 54,80) = 8,331, p <0,001), o que indica que se produciu a aprendizaxe da extinción (Fig. 2D). ). Зате наблюдался значительный основanos тренировки уашения (F (2.884, 54,80) = 8,331, p <0,001), что уеказызыâ на то что обенение anta рис. 2D). Houbo entón un efecto principal significativo do bloque de proba (5 tons por bloque) sobre o tempo necesario para conxelar durante o adestramento de extinción (F(2,884, 54,80) = 8,331, p <0,001), o que indica que a aprendizaxe da extinción estaba a ter lugar (Fig. . 2D). ).接下来，在消退训练期间，试块（每块5 音）对冻结时间有显着的主敼的主效块（块5 音）对冻结时间有显着的主（强8.（（8（（8（，，，， 31，p < 0,001），表明发生了消退学习（图2D） ） 。接下来，在消退训练期间，试块（每块5 音）对冻结时间有显着的主敼的主效块（块5 音）对冻结时间有显着的主（强8.（（8（（8（，，，， 31，p < 0,001），表明发生了消退学习（图2D） ） 。 Затем, во время обучения угашению, пробные блоки (5 тонов на блок) оказали значитению значитено в начитено в на блок мя замирания (F (2,884, 54,80) = 8,331, p <0,001), что указывает на то, что обучение угашение угашению . 2D). Despois, durante a aprendizaxe de extinción, os bloques de proba (5 tons por bloque) tiveron un efecto principal significativo no tempo de desvanecemento (F(2,884, 54,80) = 8,331, p < 0,001), o que indica que a aprendizaxe da extinción se estaba a producir (Fig. 2D). .Non obstante, o grupo de extinción (F(1, 19) = 3,091, p = 0,095) non tivo un efecto significativo no tempo de desvanecemento durante todo o período de adestramento de extinción, e non houbo interacción entre o bloque de proba e o grupo de extinción (F(4). , 19)).76) = 1,890, p = 0,121) (Fig. 2D). Durante a sesión de probas, houbo unha diferenza significativa entre os grupos de boa extinción, mala extinción e recordo do medo no tempo que pasaron conxelados durante o período de referencia (X2 (2) = 8,569, p = 0,014) de tal xeito que o grupo de recordo do medo conxelouse significativamente. máis que o grupo de extinción boa (Mean Rank Diff. = 10,57, p = 0,017), pero non o grupo de extinción pobre (Mean Rank Diff. = − 3,714, p > 0,999) (Fig. 2D). Durante a sesión de probas, houbo unha diferenza significativa entre os grupos de boa extinción, mala extinción e recordo do medo no tempo que pasaron conxelados durante o período de referencia (X2 (2) = 8,569, p = 0,014) de tal xeito que o grupo de recordo do medo conxelouse significativamente. máis que o grupo de extinción boa (Mean Rank Diff. = 10,57, p = 0,017), pero non o grupo de extinción pobre (Mean Rank Diff. = − 3,714, p > 0,999) (Fig. 2D).Durante a sesión de probas, houbo unha diferenza significativa entre os grupos de boa extinción, mala extinción e recordo do medo no tempo que pasaron conxelados durante o período de referencia (X2(2) = 8,569, p = 0,014), de forma que o grupo de recordo do medo conxelouse. significativamente.больше, чем в группе хорошего вымирания (средняя разница рангов = 10,57, p = 0,017), но нограния средняя разница рангов = -3.714, p> 0.999) (рис. 2D). maior que no grupo de extinción boa (diferenza de rango media = 10,57, p = 0,017) pero non no grupo de extinción mala (diferenza de rango media = -3,714, p > 0,999) (Figura 2D).在测试期间，良好消退组、不良消退组和恐惧回忆组在基线期冻结时间昹结时间昹组和恐惧回忆组在基线期冻结时间昹结时间昹靜(2) = 8,569，p = 0,014），因此恐惧回忆组冻结显着超过良好的灭绝组（平均秩差= 10,57，p = 0,017），但不是差的灭绝组（平均秩差= – 3,714（p > （2）D）0,999在 测试 期间 ， 良好 消退组 、 消 退组 和 恐惧 在 基线期 冻好 消退组 、 消 退组 和 恐惧 在 基线期 冻结 时關 傘 时间 方间 方间 方（（x2 (2) = 8,569 ， p = 0,014） ， 恐惧 回忆组 冻结 显着 良好 的 组 组 组 组 组组 组 组（平均秩差= 10,57，p = 0,017），但不是差绝组（平均秩差= – 3,714＾0,017）（9）P. В течение периода тестирования наблюдалась значительная разница между группой спой хорус пой хорус плохим угашением и группой с припоминанием страха с точки зрения времени замирания на 8, p = 0,014), поэтому припоминание страха группа замерзает значительно чаще , чем группа с хорошим вымиранием (средняя разница рангов = 10,57, p = 0,017), не не групица средняя разница рангов = 0,017 азница рангов = -3.714, p> 0.999) (рис. 2D). Durante o período de proba, houbo unha diferenza significativa entre o grupo de boa extinción, o grupo de extinción pobre e o grupo de recordo do medo en termos de tempo de conxelación na liña de base (X2(2) = 8,569, p = 0,014), polo que o recordo do medo o grupo conxélase significativamente máis frecuentemente que o grupo con boa extinción (diferenza media de rango = 10,57, p = 0,017) pero non o grupo con extinción pobre (diferenza de rango media = -3,714, p > 0,999) (Figura 2D).O grupo de boa extinción, o grupo de extinción pobre e o grupo de lembranza do medo tamén tiveron tempos de desvanecemento significativamente diferentes durante a presentación do ton da sesión de proba (X2(2) = 14,93, p = 0,001), polo que o grupo de boa extinción tivo significativamente menos tempo.tempo de conxelación que no grupo de extinción débil (diferenza de rango media = 9,286, p = 0,044) e o grupo de memoria do medo (diferenza de rango media = 13,86, p = 0,001) (Fig. 2D).
Diferenzas individuais na lembranza da extinción.(A) Esquema de procedementos cirúrxicos e de comportamento.(B) Distribución de frecuencias que mostra diferenzas individuais nas puntuacións de memoria que desaparecen.(C) Evidencia de que os grupos deseñados en función das puntuacións calculadas de lembranza de extinción representan dous fenotipos diferentes.(D) Porcentaxe media de tempo que as ratas se conxelan por mala extinción, boa extinción e recordo do medo en células de 30 segundos dunha sesión de reflexo de medo condicionado, en tons 20, 30 s, colapsados ​​en 5 bloques durante a sesión de aprendizaxe de extinción (4 tons) .cada unha), e en catro tons en sesións de recordos de esmorecemento e recordos de medo.As barras de erro representan a desviación estándar da media. *p < 0,05, **p < 0,01, ***p < 0,001, ****p < 0,0001. *p < 0,05, **p < 0,01, ***p < 0,001, ****p < 0,0001. *р < 0,05, **р < 0,01, ***р < 0,001, ****р < 0,0001. *p < 0,05, **p < 0,01, ***p < 0,001, ****p < 0,0001. *p <0,05，**p <0,01，***p <0,001，****p <0,0001. *p <0,05，**p <0,01，***p <0,001，****p <0,0001. *р < 0,05, **р < 0,01, ***р < 0,001, ****р < 0,0001. *p < 0,05, **p < 0,01, ***p < 0,001, ****p < 0,0001.
Inxectouse un indicador retrógrado no IL (Fig. 3A) e determinouse o número de células GFP+ ao longo do eixe anterior-posterior da rexión de interese (Fig. 3B-F).Houbo unha diferenza significativa no número de células GFP+ entre PVT anterior, medio e posterior (X2(2) = 8.200, p = 0.017), polo que mPVT mostrou significativamente máis células GFP+ que aPVT (rango medio) Diff.= 18,37, p = 0,035) e pPVT (rango medio Diff. = 17,71, p = 0,045) (Fig. 3C).Aínda que varios animais non detectaron células GFP+ no pCLA e, polo tanto, non puideron mapear a actividade nesta rexión, non houbo diferenzas significativas entre CLA anterior, medio e posterior (X2(2) = 5,596, p = 0,061).Número de células GFP+ (Figura 3D).Despois, dado que algunhas células GFP+ se atoparon en aBLA ou avHPC en varias ratas, só se analizaron a parte media e posterior destas áreas.O BLA medio e posterior (U=393, p=0,009) diferían significativamente no número de células GFP+, polo que pBLA mostrou máis proxeccións de IL que mBLA (Figura 3E).Do mesmo xeito, houbo unha diferenza significativa entre os vHPC medios e posteriores, polo que os pvHPC mostraron máis proxeccións de IL que os mvHPC (U = 403,5, p = 0,014) (Figura 3F).A figura 3G é unha imaxe exemplar que mostra Fos, aavRG-GFP e células con dobre etiqueta.
Cuantificar aferentes IL en toda a rexión cerebral de interese.(A) Representación esquemática da distribución de aavRG-CAG-GFP en IL de rata completa.(B) Imaxes representativas de marcadores retrógrados en diferentes localizacións anteroposteriores da rexión cerebral de interese.Cuantificación do marcado retrógrado ao longo do eixe anteroposterior (C) tálamo paraventricular, (D) clavícula, (E) amígdala basolateral e (F) hipocampo ventral.(G) Imaxes representativas que mostran etiquetaxe aavRG retrógrada, etiquetado Fos e etiquetado dobre aavRG e Fos en aPVT.As barras de erro representan a desviación estándar da media. *p < 0,05, **p < 0,01. *p < 0,05, **p < 0,01. *р < 0,05, **р < 0,01. *p < 0,05, **p < 0,01. *p < 0,05，**p < 0,01. *p < 0,05，**p < 0,01. *р < 0,05, **р < 0,01. *p < 0,05, **p < 0,01.Barra de escala 100 µm.O mapa cerebral de dominio público no panel A reprodúcese de Swanson (2004) Brain Map: Rat Brain Structure, 3rd Edition, baixo a licenza Creative Commons Attribution-NonCommons 4.0 International License (https://creativecommons.org/licenses/by-nc). )./4.0/) dispoñible para descargar en https://larrywswanson.com.
Analizouse a actividade Fos global e específica de proxección de IL en aPVT, mPVT e pPVT en todas as ratas.Non houbo diferenzas significativas entre unha boa extinción, unha mala extinción, o recordo do medo e os grupos de células domésticas na expresión de Fos en aPVT (X2 (3) = 3,888, p = 0,274) (Fig. 4A), nin houbo unha correlación significativa entre Fos. en aPVT entre a expresión e a lembranza de extinción (rs = 0,092, p = 0,691) (Figura 4B) ou entre a expresión de Fos en aferentes IL de aPVT e a lembranza de extinción (rs = 0,143, p = 0,537) (Figura 4D).Non obstante, nas aferentes IL aPVT, a expresión de Fos difería significativamente entre os grupos de boa extinción, mala extinción, recordo de medo e células domésticas (X2(3) = 15,05, p = 0,002), polo que o grupo de recordo de medo mostrou unha extinción relativamente boa.grupos de regresión (diferenza de rango media = 11,54, p = 0,003), regresión pobre (diferenza de rango media = 10,57, p = 0,034) e grupos de células domésticas (diferenza de rango media = 12,79, p = 0,005) (Fig. 4C).Ademais, non houbo diferenzas significativas entre a boa extinción, a mala extinción, o recordo do medo e os grupos de células domésticas para a expresión de Fos en mPVT (X2 (3) = 2,272, p = 0,518) (Fig. 4E) e para a expresión de Fos en mPVT..Correlación significativa co recordo da extinción (rs = 0,168 p = 0,468) (Figura 4F).Aínda que houbo unha diferenza significativa entre os grupos de células boas, malas, de recordo de medo e de orixe na expresión de Fos en células mPVT aferentes a IL (X2 (3) = 9,252, p = 0,026), a comparación post hoc non revelou ningunha ou dúas.Diferenzas significativas entre grupos (Figura 4G).Ademais, non houbo correlación significativa entre a expresión de Fos nas células mPVT aferentes a IL e o recordo da extinción (rs = 0,174, p = 0,450) (Figura 4H). A continuación, houbo unha diferenza significativa entre os grupos de boa extinción, mala extinción, recordo do medo e gaiolas domésticas na expresión de Fos no pPVT (X2 (3) = 13,89, p = 0,003), de forma que o grupo de boa extinción (Ranking medio). Diff. = 14,96, p = 0,010), pero non a pobre extinción (Mean Rank Diff. = 12,86, p = 0,113) ou o grupo de recordo do medo (Mean Rank Diff. = 2,571, p > 0,999), mostrou máis expresión de Fos que o grupo de gaiolas na casa (Fig. 4I). A continuación, houbo unha diferenza significativa entre os grupos de boa extinción, mala extinción, recordo do medo e gaiolas domésticas na expresión de Fos no pPVT (X2 (3) = 13,89, p = 0,003), de forma que o grupo de boa extinción (Ranking medio). Diff. = 14,96, p = 0,010), pero non a pobre extinción (Mean Rank Diff. = 12,86, p = 0,113) ou o grupo de recordo do medo (Mean Rank Diff. = 2,571, p > 0,999), mostrou máis expresión de Fos que o grupo de gaiolas na casa (Fig. 4I). Далее, наблюдалась значительная разница между группами с хорошим угасанием, плосанием, плохтамшо между а и домашней клеткой в ​​​​экспрессии Fos в pPVT (X2 (3) = 13,89, p = 0,003), так что группа с хорошам с хорошим грошим Dif. = 14,96, p = 0,010), non hai ningún tipo de diferenza страхе (средняя ранговая разница = 2.571, p > 0.999), демонстрировалась более выраженная экспрессия Fos, чем в группе группа домашних клеток (рис. 4I). Ademais, houbo unha diferenza significativa entre unha boa extinción, unha mala extinción, o recordo do medo e os grupos de células domésticas na expresión de Fos en pPVT (X2(3)=13,89, p=0,003), polo que o grupo de boa extinción (dif. = 14,96, p = 0,010), pero non no grupo de extinción pobre (diferenza de rango media = 12,86, p = 0,113) nin o grupo de memoria do medo (diferenza de rango media = 2,571, p > 0,999), mostrou unha expresión de Fos máis pronunciada que en o grupo de células domésticas (Figura 4I).其次 ， ppvt 中 fos 表达 好 消 、 差消 、 恐惧 和 家笼组 之间 存在 显着 差消 和 家笼组 之间 存在 显着 （ 3 （ （ 3 （ 3 （ 38. p = 0,003） 使得 消组 （（Diferencia de rango media.= 14,96, p = 0,010)，但不是较差的消退(Diferencia de rango media = 12,86, p = 0,113) 或恐惧回忆组(Diferencia de rango media = 2,50,91, p.笼组（图4I ）。= 14,96, p = 0,010)，但不是较差的消退(Diferencia de rango media = 12,86, p = 0,113) ）。En segundo lugar, houbo diferenzas significativas na expresión de Fos en pPVT entre os grupos de células boas, malas, de recordo do medo e domésticas (X2 (3) = 13,89, p = 0,003), o que fai que o grupo de inxestión boa (diferenza de rango media = 14,96)., p = 0,010), но не хуже по угашению (средняя разница рангов = 12,86, p = 0,113) или группе отзрангов ца рангов = 2.571, p > 0.999), чем в группе домашней клетки (рис. 4I) . , p = 0,010), pero non peor en extinción (diferenza media de rango = 12,86, p = 0,113) ou grupo de recordo de medo (diferenza media de rango = 2,571, p > 0,999) que o grupo de células domésticas (Figura 4I)..Non obstante, non houbo correlación significativa entre a expresión de pPVT Fos e a lembranza da extinción (rs = 0,051, p = 0,825) (Figura 4J).Finalmente, houbo unha diferenza significativa na expresión de Fos nas aferentes de pPVT IL entre os grupos con boa extinción, mala extinción, recordos de medo e nas células domésticas (X2(3) = 12,34 p = 0,006), polo que unha boa expresión de Fos en IL- foi peor que nos grupos de extinción (diferenza media de rango = 12,54, p = 0,014) e na célula doméstica (diferenza de rango media = 12,89, p = 0,049) (Fig. 4K) e correlacionouse significativamente coas aferentes IL dentro de pPVT Entre a activación e revogación da extinción, mellor recordo da extinción asociouse cunha maior activación destes aferentes IL (rs = -0,438, p = 0,047) (Figura 4L).
A actividade de Fos aumentou nas aferentes IL do tálamo paraventricular posterior (PVT) en ratas, o que mostrou unha boa regresión.(A) Non houbo diferenzas significativas entre os grupos na expresión de Fos en aPVT.(B) Non houbo correlación significativa entre a expresión de Fos e a lembranza da extinción en aPVT.(C) O grupo de lembranza do medo mostrou unha maior expresión de Fos nas aferentes IL en comparación con todos os outros grupos.(D) Non houbo correlación significativa entre a expresión de Fos en aferentes IL e a lembranza da extinción en aPVT.(E) Non houbo diferenzas significativas entre os grupos na expresión de Fos en mPVT.(F) Non houbo correlación significativa entre a expresión de Fos e a memoria de extinción na mPVT.(G) A expresión de Fos nas células IL aferentes en mPVT non diferiu significativamente entre os grupos.(H) Non houbo correlación significativa entre a expresión de Fos en aferentes IL e a lembranza da extinción en mPVT.(I) Un grupo ben extinto, pero ningún outro grupo, mostrou un aumento da actividade de Fos na pPVT en comparación co grupo da gaiola doméstica.(J) Non houbo correlación significativa entre a expresión de Fos e a lembranza da extinción en pPVT.(K) O grupo de boa extinción mostrou unha maior expresión de Fos nas células aferentes IL en comparación co grupo de extinción débil e o grupo de células domésticas.(L) Hai unha correlación significativa entre a expresión de Fos nas aferentes IL e a lembranza da extinción, polo que unha boa lembranza da extinción está asociada cunha maior expresión de Fos nas aferentes IL.As barras de erro representan a desviación estándar da media. *p < 0,05, **p < 0,01. *p < 0,05, **p < 0,01. *р < 0,05, **р < 0,01. *p < 0,05, **p < 0,01. *p < 0,05，**p < 0,01. *p < 0,05，**p < 0,01. *р < 0,05, **р < 0,01. *p < 0,05, **p < 0,01.
A continuación analizouse a actividade de Fos global e específica da proxección de IL en aCLA e mCLA de ratas en todos os grupos. Houbo unha diferenza significativa entre os grupos de boa extinción, mala extinción, recordo do medo e gaiola doméstica na expresión de Fos no aCLA (X2 (3) = 8,455, p = 0,036) de tal xeito que o grupo de recordo do medo (Mean Rank Diff. = ( Figura 5A). Houbo unha diferenza significativa entre os grupos de boa extinción, mala extinción, recordo do medo e gaiola doméstica na expresión de Fos no aCLA (X2 (3) = 8,455, p = 0,036) de tal xeito que o grupo de recordo do medo (Mean Rank Diff. = ( Figura 5A). Межд Tes гепами с хорошим уеашением, плохим eder уением, припомианием страха и шшшзшшшшшшшшш Tes хххххх шшшшхххKюаа зшшшшшшиKюаааазззшизиKюааазззшшзKюаазззззKюззззззшзюзюююзюзюзз viaxe зница в экспрессии fos в acla (x2 (3) = 8.455, p = 0,036), та что гто гуупа припоминания сзх с50 = 0,049), но ни плохая (средняя ранговая разница = 10,21, p = 0,373), ни группа с хорошим выенговая разница ца = 4.607, p > 0.999) не демонстрировали большей экспрессии Fos, чем группа в домашней клетксии . 5A). Houbo unha diferenza significativa na expresión de aCLA Fos entre os grupos de boa extinción, mala extinción, recordo do medo e células domésticas (X2(3) = 8,455, p = 0,036), polo que o grupo de recordo do medo (diferenza media de rango = 14,50, p = 0,049), pero nin os pobres (diferenza de rango media = 10,21, p = 0,373) nin o grupo de extinción bo (diferenza de rango media = 4,607, p > 0,999) mostraron máis expresión de Fos que o grupo de células domésticas (Fig. 5A). . aCLA 中Fos 表达的良好消退、消退差、恐惧回忆和家庭笼组之间存在显着在显着在显着在显着 在显着 弌 50, 8 = 2 (45) 0, 8 p.因此恐惧回忆组(Diferencia media de rango = 14,50，p = 0.049），但无论是差（平均秩差= 10.21，p = 0.373）还是良好灭绝（平均秩差（平均秩差（4.秩，，，，，，90.90.都显示出比家庭笼组更多的Fos 表达（图5A) 。 Acla 中 fos 表达 的 消退 、 消退差 、 回忆 和 家庭 笼组 之间 存在 显着 差异 傮 差异异 (x2 (3) = 8,455, p = 0,036) ， 因此 恐惧 回忆组 回忆组 回忆组 回忆组 (media Diferencia de rango = 14,50 ， P = P = P = P = P = 14. 0,049） ， 但 无论是 差 平均 秩差 秩差 = 10,21 ， p = 0,21 ， 论是 0.平均 秩差 秩差 = 4,607 ， p> 0,999） 组 都 出 比 家庭 笼组 更 多 的 表达 图 图 图 5a) 。 Ыыла значительная разница межж гуупами с хошим уеашением, плохим уеашением, озывомвомо ¡ сии fos в acla (x2 (3) = 8.455, p = 0,036), поэтом Tes гууа озыва страха (среднеti рггое различ! = 14,50), p. = 0,049), но группы с плохим (средняя разница рангов = 10,21, p = 0,373) и с хорошим вымирание вымиранием = 4 ,607, p > 0,999) показали более высокую экспрессию Fos, чем группа с домашней клеткой (рис. 5A). Houbo unha diferenza significativa entre a boa extinción, a mala extinción, o recordo do medo e os grupos de células domésticas na expresión de aCLA Fos (X2(3) = 8,455, p = 0,036), polo que o grupo de recordo do medo (diferenza de rango media = 14,50), p = 0,049 ), pero os grupos con pobre (diferenza de rango media = 10,21, p = 0,373) e boa extinción (diferenza de rango media = 4,607, p> 0,999) mostraron unha expresión de Fos máis alta que o grupo de células domésticas (Fig. 5A). .Non houbo correlación significativa entre a expresión global de Fos en (rs = 0,036, p = 0,876) (Figura 5B) ou a expresión de Fos en células aferentes IL aCLA (rs = -0,282, p = 0,215) e o recordo da extinción (Figura 5B)..5D), tampouco houbo diferenzas significativas entre unha boa extinción, unha mala extinción, o recordo do medo e os grupos de células domésticas na expresión de Fos en aferentes aCLA IL (X2 (3) = 6,722, p = 0,081) (Figura 5C)..). A continuación, houbo unha diferenza significativa entre os grupos de boa extinción, mala extinción, recordo de medo e gaiolas na expresión de Fos no mCLA (X2 (3) = 10,12, p = 0,018) de tal xeito que o grupo de boa extinción (Mean Rank Diff) . = 12,93, p = 0,038), pero nin a mala extinción (Mean Rank Diff. = 5,143, p > 0,999) nin os grupos de recordo do medo (Mean Rank Diff. = 14,00, p = 0,063) mostraron significativamente máis expresión de Fos no mCLA en relación ao grupo da gaiola doméstica (Fig. 5E). A continuación, houbo unha diferenza significativa entre os grupos de boa extinción, mala extinción, recordo de medo e gaiolas na expresión de Fos no mCLA (X2 (3) = 10,12, p = 0,018) de tal xeito que o grupo de boa extinción (Mean Rank Diff) . = 12,93, p = 0,038), pero nin a mala extinción (Mean Rank Diff. = 5,143, p > 0,999) nin os grupos de recordo do medo (Mean Rank Diff. = 14,00, p = 0,063) mostraron significativamente máis expresión de Fos no mCLA en relación ao grupo da gaiola doméstica (Fig. 5E). Затем наблюдалась значительная разница между группами с хорошим угашением, плониманим, плониманим, плоница между о страхе и домашней клеткой в ​​​​экспрессии Fos в mCLA (X2 (3) = 10,12, p = 0,018), так что групрессии страхе и домашней клеткой в ​​​​экспрессии зница рангов . = 12,93, p = 0,038), но ни группы плохого угашения (средняя ранговая разница = 5,143, плохого угашения) раха (средняя ранговая разница = 14,00, p = 0,063) не показали значительно большей экспрессии Fos en mCLA. Houbo entón unha diferenza significativa entre a boa extinción, a mala extinción, os recordos de medo e os grupos de células domésticas na expresión de mCLA Fos (X2(3) = 10,12, p = 0,018), polo que o grupo de boa extinción (rango de diferenza media = 12,93, p = 0,038), pero nin os grupos de extinción pobres (diferenza de rango media = 5,143, p > 0,999) nin os grupos de recordo de medo (diferenza de rango media = 14,00, p = 0,063) mostraron unha expresión de Fos significativamente maior en mCLA.en comparación co grupo da gaiola doméstica (Figura 5E).接下来 ， 在 mcla 中 的 fos 表达 ， 良好 消退组 、 不良 消 退组 、 恐惧 回 忮 回显着 差异 （x2 （3） = 10,12 ， p = 0,018） ， 良好 （（（（（（ （（（ Diferencia de rango medio.= 12,93, p = 0,038)，但在mCLA 中，弱消退（平均秩差= 5,143，p > 0,999）和恐惧回忆秈4.0. ，p = 0,063）均未显示出更多的Fos 表达相对于家庭笼组（图5E）. = 12,93, p = 0,038) ， 在 在 mcla 中 ， 弱消退 （平均 秩差 秩差 秩差 = 5,143 ， 弱消退 （平均 秩差 秩差 秩差 = 5,143 ， 弱消退（平均 秩差 秩差 秩差 = 5,143 ， 弱消退 （平均均 秩差 = 14,00 ， p = 0,063） 未 显示 出 更 多 的fos 表达 表达 的 fos 表达 表达 的 fos 表达相对于家庭笼组（图5E）。 Далее, в экспрессии Fos в mCLA наблюдалась значительная разница между группой с хоруем групой с хорумош пимош прессии им угасанием, группой с отзывом о страхе и группой с домашней клеткой (X2(3) = 10,12, p = 0,018, готрашней клеткой) угашения (средняя разность рангов = 12,93, p = 0,038), но в mCLA ни слабое угасание (средня рангов = разнаи, 9, 9), ни группа отзыва страха (средняя разница рангов = 14,00, p = 0,999) = 0,063) показали лучшую экспрессию Много Fos по сравнению с группой с домашней клетсунй). Ademais, houbo unha diferenza significativa na expresión de Fos en mCLA entre o grupo de boa extinción, o grupo de extinción pobre, o grupo de retroalimentación do medo e o grupo de células domésticas (X2(3) = 10,12, p = 0,018), polo que o bo extinción (diferenza media de rango = 12,93, p = 0,038), pero no mCLA nin a extinción débil (diferenza de rango media = 5,143, p > 0,999) nin o grupo de recordo do medo (diferenza media de rango = 14,00, p = 0,999) = 0,063) mostraron mellor. Expresión de Multi Fos en comparación co grupo de células domésticas (Figura 5E).Non obstante, a expresión global de Fos en mCLA (rs = 0,321, p = 0,156) (Fig. 5F) ou en células IL mCLA aferentes (rs = -0,121, p = 0,602) e a lembranza da extinción (Fig. 5H), non hai diferenzas significativas entre grupos con boa extinción, mala extinción, recordo do medo e unha célula doméstica para a expresión de Fos en células aferentes IL mCLA (X2 (3) = 4,923, p = 0,178) (Figura 5G).
A actividade de Fos foi elevada a mediados do claustro en ratas con boa memoria de extinción.(A) O grupo de lembranza do medo, pero non os outros grupos, mostrou unha actividade de Fos maior en comparación co grupo de células domésticas en aCLA.(B) Non houbo correlación significativa entre a expresión de Fos en aCLA e o recordo da extinción.(C) A expresión de Fos nas células aCLA aferentes a IL non difiriu significativamente entre os grupos.(D) Non houbo correlación significativa entre a expresión de Fos en aferentes IL e a lembranza da extinción en aCLA.(E) O grupo ben extinto, pero non os outros grupos, mostrou unha actividade de Fos aumentada no mCLA en comparación co grupo de células domésticas.(F) Non houbo correlación significativa entre a expresión de Fos e a lembranza da extinción no mCLA.(G) A expresión de Fos nas células aferentes de IL mCLA non difería significativamente entre os grupos.(H) Non houbo correlación significativa entre a expresión de Fos en aferentes IL e o recordo de extinción en mCLA.As barras de erro representan a desviación estándar da media. *p < 0,05. *p < 0,05. *r < 0,05. *p < 0,05. *p < 0,05. *p < 0,05. *r < 0,05. *p < 0,05.
Despois analizouse a actividade de Fos global e específica de proxección de IL en mBLA e pBLA en todos os grupos de ratas.Non houbo diferenzas significativas entre unha boa extinción, unha mala extinción, o recordo do medo e os grupos de células domésticas na expresión de Fos en mBLA (X2 (3) = 0,944, p = 0,815) (Figura 6A).Tampouco houbo diferenzas significativas entre os grupos con boa regresión, regresión pobre, recordo de medo e expresión Fos de células domésticas en células aferentes IL mBLA (X2 (3) = 0,518, p = 0,915) (Figura 6C).Ademais, non houbo correlación significativa entre a expresión global de Fos en mBLA (rs = 0,126, p = 0,588) (Figura 6B) e a expresión de Fos nas células aferentes IL mBLA (rs = 0,200, p = 0,385) (rs = 0,200, p = 0,385).p = 0,385).Figura 6D) e recordo de extinción.Tampouco houbo diferenzas significativas na boa extinción, a mala extinción, a memoria do medo e os grupos de células domésticas na expresión de Fos en pBLA (X2(3) = 4,246, p = 0,236) (Fig. 6E), e tampouco houbo diferenza significativa. en pBLA Bo.extinción, mala extinción, recordo do medo e grupos de células domésticas na expresión de Fos en células aferentes IL (X2(3)=1,954, p=0,582) (Figura 6G).Finalmente, a expresión global de Fos en pBLA (rs = 0,070, p = 0,762) (Fig. 6F) e a expresión de Fos en células aferentes de pBLA IL (rs = 0,122, p = 0,597) e o recordo da extinción (Fig. 6H).
As diferenzas individuais na reprodución da extinción non foron mapeadas coas diferenzas na expresión de Fos na amígdala basolateral.(A) Non houbo diferenzas significativas entre grupos na expresión de Fos en mBLA.(B) Non houbo correlación significativa entre a expresión de Fos e a lembranza da extinción en mBLA.(C) A expresión de Fos nas células aferentes de IL mBLA non difería significativamente entre os grupos.(D) Non houbo correlación significativa entre a expresión de Fos nas células aferentes IL e o recordo da extinción en mBLA.(E) Non houbo diferenzas significativas entre grupos na expresión de Fos en pBLA.(F) Non houbo correlación significativa entre a expresión de Fos e a lembranza da extinción en pBLA.(G) A expresión de Fos nas células IL pBLA aferentes non diferiu significativamente entre os grupos.(H) Non houbo correlación significativa entre a expresión de Fos nas células aferentes IL e o recordo da extinción en pBLA.As barras de erro representan a desviación estándar da media.
Finalmente, analizouse a actividade de Fos global e específica de proxección de IL en mvHPC e pvHPC en todas as ratas. Houbo unha diferenza significativa entre os grupos de boa extinción, mala extinción, recordo de medo e gaiolas na expresión de Fos no mvHPC (X2 (3) = 8,056, p = 0,045) de tal xeito que a boa extinción (Mean Rank Diff. = 13,29). , p = 0,031), pero nin os grupos de mala extinción (Mean Rank Diff. = 6,857, p > 0,999) nin de recordo do medo (Mean Rank Diff. = 8,000, p = 0,864) mostraron máis expresión de Fos que o grupo da gaiola doméstica (Fig. 7A). Houbo unha diferenza significativa entre os grupos de boa extinción, mala extinción, recordo de medo e gaiolas na expresión de Fos no mvHPC (X2 (3) = 8,056, p = 0,045) de tal xeito que a boa extinción (Mean Rank Diff. = 13,29). , p = 0,031), pero nin os grupos de mala extinción (Mean Rank Diff. = 6,857, p > 0,999) nin de recordo do medo (Mean Rank Diff. = 8,000, p = 0,864) mostraron máis expresión de Fos que o grupo da gaiola doméstica (Fig. 7A). Между гуупами с хорим eder уасанием, плохим eder уением, отзывоorm экспресссии fos в mvhpc (x2 (3) = 8.056, p = 0,045), тк что хорошее antos = 0,031), но ни в группах с плохим угасанием (средняя ранговая разница = 6,857, p > 0,999), ни в средняя ранговая разница едняя ранговая разница = 8,000, p = 0,864) экспрессия Fos была выше, чем в группе с домашней клеткой (рис. 7А). Houbo unha diferenza significativa na expresión de mvHPC Fos entre os grupos con boa extinción, mala extinción, recordo do medo e células domésticas (X2(3) = 8,056, p = 0,045), polo que unha boa extinción (diferenza media de rango = 13,29), p = 0,031), pero nin no grupo de extinción pobre (diferenza de rango media = 6,857, p > 0,999) nin no grupo de recordo de medo (diferenza de rango media = 8,000, p = 0,864) a expresión de Fos foi maior que no grupo de orixe.célula (Fig. 7A). mvHPC 中Fos 表达的良好消退、不良消退、恐惧回忆和家庭笼组之间存在显存在显存在显着 8,0 = 0,50 p 45），因此良好消退（平均秩差= 13,29） ，p = 0,031 ），但无论是弱消退（平均秩差= 6.857，p > 0.999）还是恐惧回忆（平均秩差= 8.，秩差 = 8.） 0.999）都显示出比家庭笼组更多的Fos 表达（图2）。 mvhpc 中 fos 表达 的 消退 、 不良 消退 恐惧 回忆 和 家庭 笼组 之间 存在 存在 存在 嘾睼 嘾 在 显 2 56, p = 0,045） ， 良好 （（平均 秩差 秩差 = 13,29） p = 0,031 ） ， 但 无论是 弱消退 （平均 秩差 秩差 = 6,857 ， p> 0,999） 还是 恐惧 （秩差 幧 0,857 ， p = 0,864） 组都 出 家庭 笼组 多 的 fos 表达 图 图。。。。 ）））））））））））））））））））））) Имелась значительная разница между группами «хорошо», «плохо», «припоминание страхание страхание страханание страхание между группами «хорошо» ессии Fos en mvHPC (X2(3) = 8,056, p = 0,045) и, следовательно, хорошая регрессия (средняя разница = разница 13,29), p = 0,031), но группы со слабым угасанием (средняя разница рангов = 6,857, p > 0,999) и воми наспи разница рангов = 8,000, p = 0,864) показали более высокую экспрессию Fos, чем группа в домашней клетке (рис. 2). Houbo unha diferenza significativa entre o bo, o malo, o recordo do medo e os grupos de células domésticas para a expresión de Fos en mvHPC (X2(3) = 8,056, p = 0,045) e, polo tanto, unha boa regresión (diferenza de rango media = 13,29), p = 0,031), pero os grupos con extinción débil (diferenza de rango media = 6,857, p > 0,999) e recordos de medo (diferenza de rango media = 8,000, p = 0,864) mostraron unha expresión de Fos máis alta que o grupo na gaiola doméstica (Fig. 2).7A).Non obstante, non houbo diferenza significativa (X2 (3) = 4,893, p = 0,180) (Figura 7C).Ademais, non houbo correlación significativa entre a expresión global de Fos en mvHPC (rs = -0,233, p = 0,309) (Figura 7B) e a expresión de Fos nas células IL aferentes de mvHPC (rs = 0,056, p = 0,810) (Figura 7D).e un informe sobre a desaparición.Ademais, non houbo diferenzas significativas entre unha boa extinción, unha mala extinción, o recordo do medo e os grupos de células domésticas na expresión de Fos en pvHPC (X2 (3) = 3,623, p = 0,353) (Figura 7E) e non houbo diferenzas significativas.diferenza na boa regresión da expresión de Fos en células IL aferentes pvHPC, mala regresión, memoria do medo e grupos de células domésticas (X2 (3) = 3,871, p = 0,276) (Fig. 7G).Finalmente, non houbo correlación significativa entre a expresión global de pvHPC Fos (rs = -0,127, p = 0,584) (Figura 7F) e a expresión de Fos en células pvHPC aferentes a IL (rs = 0,176, p = 0,447) e o recordo da extinción (Figura 7F). ).7H).
A expresión de fos é elevada no hipocampo ventral das ratas, o que indica unha boa extinción da memoria.(A) O grupo ben extinto, pero non os outros grupos, mostrou unha maior expresión de Fos en mvHPC en comparación co grupo de células domésticas.(B) Non houbo correlación significativa entre a expresión de Fos e a lembranza da extinción en mvPHC.(C) A expresión de Fos nas células IL aferentes de mvHPC non difería significativamente entre os grupos.(D) Non houbo correlación significativa entre a expresión de Fos en aferentes IL e o recordo da extinción en mvHPC.(E) Non houbo diferenzas significativas entre os grupos na expresión de Fos en pvHPC.(F) Non houbo correlación significativa entre a expresión de Fos e a lembranza da extinción en pvHPC.(G) A expresión de Fos nas células IL aferentes pVHPC non difería significativamente entre os grupos.(H) Non houbo correlación significativa entre a expresión de Fos en aferentes IL e o recordo da extinción en pvHPC.As barras de erro representan a desviación estándar da media. *p < 0,05. *p < 0,05. *r < 0,05. *p < 0,05. *p < 0,05. *p < 0,05. *r < 0,05. *p < 0,05.A nosa análise principal para todas as rexións mostrou unha comparación en tres niveis ao longo do eixe anteroposterior, aínda que tamén analizamos cada rexión que colapsou ao longo do eixe anteroposterior.Os resultados destas análises preséntanse na táboa 1.
Aquí probamos se as diferenzas individuais na lembranza da extinción se reflectirían en diferentes patróns de actividade aferente no córtex límbico inferior.Para iso, avaliouse a actividade de Fos nas proxeccións de IL desde o tálamo paraventricular, o claustro, a amígdala basolateral e o hipocampo ventral despois da repetición da extinción.Nas células que proxectan IL, atopamos unha actividade máis alta na rexión posterior da PVT en ratas que mostraban un bo recordo de extinción en comparación coas ratas con mala extinción.Non houbo diferenzas nas aferentes IL do núcleo clavicular, hipocampo ventral ou amígdala basolateral.Ademais das células que proxectan IL, observouse un aumento da actividade neural en áreas seleccionadas do claustro da rata e do hipocampo ventral con boa resolución.Os nosos resultados indican que a memoria de extinción exitosa está organizada por proxeccións específicas de PVT a IL e células non dirixidas a IL no claustro e hipocampo ventral.
Descubrimos que a predición de PVT IL estaba activa en ratas que mostraban un bo recordo da extinción, o que é consistente cun estudo recente que mostra que a PVT é necesaria para a recuperación da extinción.Este estudo non utilizou manipulacións específicas da subrexión, pero mostrou que tanto as proxeccións de PVT na amígdala central lateral como as proxeccións de IL na PVT eran necesarias para reproducir a extinción.Os nosos resultados indican que, ademais da cadea IL-PVT-CeL, tamén se pode precisar unha entrada post-PVT en IL para a recuperación de extinción.Así, resulta que tanto as conexións IL eferentes como aferentes están implicadas na reprodución da extinción.Un seguinte paso importante é determinar o que fai que pPVT sinal a reprodución da extinción a nivel do circuíto neuronal.Ademais da relación coa IL, estudos previos de seguimento de condutos31,32 demostraron que o pPVT recibe entrada do gris periacueductal ventral (vPAG), que está asociado coa aprendizaxe da extinción33,34,35,36.Aínda que non se estableceu o papel do vPAG na recuperación da extinción, a predición de pPVT por vPAG é un candidato atractivo debido á súa densidade e á implicación de ambas as rexións na xeración de evidencia previa de extinción do medo.
Outro aspecto importante dos nosos resultados de PVT é que están especializados ao longo do seu eixe anterior-posterior.Sorprendentemente, a actividade neuronal da proxección de PVT en IL correlaciona co estado de comportamento contrario, de xeito que a actividade de proxección pre-PVT en IL está asociada coa lembranza do medo, mentres que a proxección de pPVT está activa despois da extinción exitosa da lembranza (é dicir, o medo).Esta heteroxeneidade funcional dentro do PVT non é sorprendente dado o traballo previo [discutido en 37].Un exemplo sorprendente de distribución funcional na PVT xurdiu recentemente nun estudo que caracterizou as propiedades de tipos celulares específicos na PVT.Este estudo mostra que as células de dopamina que expresan DRD2 exprésanse predominantemente no pPVT, inervan a cortiza das extremidades anteriores e responden a estímulos aversivos.A segunda poboación celular exprésase predominantemente en aPVT e marca a transición a un estado de baixa excitación fisiolóxica e inerva o córtex dos membros inferiores.Os nosos resultados case non encaixan neste patrón, xa que as células aPVT que proxectan IL están activas durante o recordo do medo, mentres que as proxeccións de pPVT están activas e os animais mostran baixos niveis de medo.Hai polo menos dúas posibles explicacións para a aparente discrepancia.En primeiro lugar, os tipos celulares identificados non se localizan exclusivamente nun sitio anterior-posterior do TVV.Así, as células activas de pPVT que proxectan IL en ratas con boa memoria de extinción poden pertencer a unha clase de células que teñen máis probabilidades de ser detectadas na aPVT e sinalan unha transición a un estado de baixa excitación.O mesmo pode ser certo para as células que proxectan IL en aPVT activadas despois da memoria do medo.En segundo lugar, estudos de rastrexo previos identificaron a presenza de pPVTs que proxectan IL3, aínda que algúns parecen derivados de células que conteñen DRD2, outros tipos celulares poden proxectarse a IL e activarse tras a reprodución exitosa da extinción.
Aínda que o obxectivo deste estudo era identificar diferenzas entre ratas que presentaban diferentes fenotipos de extinción, estes experimentos tamén revelaron novos datos relacionados cos mecanismos de memoria do medo.Curiosamente, atopamos un aumento da actividade de Fos no CLA anterior en ratas con memoria de medo.
A clavícula sitúase como o centro da comunicación cortical e está implicada en procesos que van desde a integración sensorial ata a atención e o sono40,41,42,43.Hai evidencias limitadas de como o claustro está implicado no condicionamento do medo ou na expresión do medo, porén, investigacións anteriores demostraron que a expresión contextual do medo está implicada na actividade de Fos no claustro.Recentemente informouse de que a inhibición das proxeccións de atresia ao córtex entorrinal durante o condicionamento do medo contextual prexudica a formación da memoria a longo prazo, aínda que non se comprobou a súa necesidade de expresión do medo.No mesmo estudo, observouse un aumento da activación de Fos cando os animais estaban expostos a un novo ambiente en comparación cos ratos expostos a un ambiente familiar.Tendo isto en conta, a activación do CLA que informamos aquí pode deberse á exposición á nova cámara durante as probas, en lugar do medo a ser recordada.Para caracterizar con máis precisión a función dos bloqueos no medo e o procesamento da situación, os estudos futuros deberían utilizar a manipulación de bloqueo dirixida.
Aínda que traballos anteriores demostraron que a PVT está asociada coa expresión da memoria do medo,45,46,47 non observamos ningún cambio na expresión total de Fos en ratas cando lembraron o medo 48 horas despois do condicionamento.Esta diferenza pódese explicar por varios factores, incluíndo o medo de probas de traballos anteriores a pistas discretas no mesmo contexto no que se produciu o condicionamento, mentres que no noso experimento, as probas realizáronse nunha nova sala.Ademais, sacrificamos aos nosos animais 60 minutos despois da proba, mentres que o traballo anterior utilizou un punto de tempo de 90 minutos.Finalmente, en estudos anteriores, a proba realizouse nunha sala na que os animais podían responder con apetito, mentres que no noso traballo as ratas foron probadas sen resposta de apetito.Aínda que isto permite un certo grao de inhibición condicionada, hai evidencias de que permitir que os animais inhiban a presión para obter alimento mentres proban se temen as pistas crea un conflito motivacional (é dicir, medo versus recompensa), que é un factor estimulante clave.participación PVT48, 49. .
Sábese que a amígdala basolateral está implicada na adquisición da extinción do medo50,51 e hai evidencias de que as proxeccións de BLA a IL tamén están implicadas neste proceso23.Non obstante, non está claro se o BLA e as súas conexións están implicados no retorno da extinción.Os estudos de imaxe23,28 mostraron un aumento da actividade do BLA en animais que lembran recordos esvaídos.Aínda que o noso traballo anterior non mostrou diferenzas na activación do BLA entre as ratas de extinción boas e malas, os nosos resultados aquí suxiren que o recordo da extinción xeralmente non afecta o BLA nin a activación na predicción de IL BLA.En consonancia cos nosos descubrimentos, aínda que os estudos de manipulación de circuítos suxiren que as entradas de IL ao BLA son importantes para a aprendizaxe da extinción, non son necesarias para o recordo da extinción.Non obstante, o papel do BLA non se pode ignorar por completo, xa que as probas recentes suxiren que certos tipos celulares do BLA son necesarios para reproducir a extinción.
Notablemente, o recordo do medo non provocou a activación de Fos no BLA, xa que estudos previos de lesións, fármacos e imaxes implicaron esta área na expresión do medo e/ou na reconsolidación do medo despois da recuperación54,55,56,57.Os datos aquí presentados combinan subnúcleo basal e lateral da amígdala, e datos anteriores suxiren que a expresión do medo impulsa a actividade de Fos no lado dorsal do núcleo lateral.Analizamos os datos subxacentes e laterais por separado, pero non houbo diferenzas en ningún dos casos (datos non mostrados) e ambas áreas colapsáronse nos datos que aquí presentamos.Non analizamos subrexións da amígdala lateral, polo que os cambios específicos nesta área poden estar enmascarados.Outra posibilidade de que non cambie a actividade de Fos en BLA débese ao tempo dos recordos de medo en comparación co condicionamento.Algúns traballos anteriores demostraron que a contribución do BLA á expresión do medo diminúe co tempo despois do condicionamento, de tal xeito que a expresión é dependente do BLA 24 horas despois do condicionamento pero independente aos 7 días (ref. 45 pero ver 58).ocorreu 48 horas despois do adestramento, polo que a falta de cambios na actividade de Fos neste momento probablemente reflicta cambios dependentes do tempo na participación do BLA na expresión do medo.
Finalmente, atopamos evidencias de que a memoria de extinción exitosa está asociada co hipocampo ventral.Isto é característico dos vHPC "intermedios" xa que non se viu o mesmo patrón na rexión posterior.De acordo co traballo anterior, non atopamos ningún cambio na activación de Fos en IL vHPC aferentes.Hai probas substanciais de que vHPC28,60,61 é necesario para a actualización do medo cando o CS ocorre fóra do contexto no que se produce o esvaecemento, e que isto depende polo menos en parte da entrada do vHPC na IL13.En base a estes resultados anteriores, esperaríamos que un esvaecemento pobre se asociase cun aumento da actividade IL prevista do vHPC.Non obstante, este non foi o caso xa que non houbo diferenzas na actividade de Fos nos vHPC marcados retrógrados proxectados con IL ou nas células non marcadas nos vHPC.Isto suxire que a incapacidade de lembrar o esvaecemento no contexto do esvaecemento pode desencadear un mecanismo diferente ao medo á renovación.
É importante ter en conta algunhas das limitacións inherentes ao deseño e á análise e como afectan ás nosas conclusións.En primeiro lugar, dividimos os animais en terzos superior e inferior, e os ratos en "bo" e "malo" en función das puntuacións de lembranza da extinción.Isto faise co fin de evitar esquemas de grupos que dividen os animais en grupos separados desde o medio da distribución, ou esquemas de grupos que exclúen os animais do medio da distribución, como a separación por mediana ou a comparación dos terzos superiores e inferiores das ratas. .queremos evitar esta situación porque a división mediana non reflicte a variabilidade das respostas humanas ao trauma que estamos tentando modelar.Ademais, aínda que comparar os terzos superior e inferior das ratas permítenos comparar grupos de tamaño similar, este enfoque ignora os animais no centro de distribución e non reflicte con precisión a variabilidade das reaccións á ferida.Aínda que o noso método pode sufrir problemas de varianza heteroxénea e de comparación de grupos con tamaños de mostra desiguais, captura o que estamos tentando imitar mellor que os métodos alternativos.
Os resultados aquí presentados axúdannos a comprender mellor como as diferenzas individuais na lembranza da extinción se reflicten nas diferenzas na actividade dos circuítos neuronais.Os nosos descubrimentos poden ser relevantes para o trastorno de estrés postraumático, que se sabe que está asociado con un medo excesivo e unha incapacidade para eliminar as respostas de medo.Amosamos que as diferenzas na lembranza da extinción están asociadas con diferenzas na actividade neuronal intrínseca e extrínseca proxectada sobre IL.Estas diferenzas distribuíronse en distintas rexións ao longo do eixe anteroposterior, destacando aínda máis a importancia de avaliar a función cerebral a nivel subrexional.As desvantaxes do método actual inclúen a relevancia do estudo e o foco nos roedores machos.As investigacións futuras deberían determinar os mecanismos neurobiolóxicos subxacentes á aprendizaxe da extinción en roedores femininos e utilizar métodos para extraer inferencias causais.
Os conxuntos de datos utilizados e/ou analizados no estudo actual están dispoñibles dos respectivos autores previa solicitude razoable.
Pavlov IP Conditioning: un estudo da actividade fisiolóxica da cortiza cerebral.(Oxford University Press, 1927).
Rothbaum, BO e Davis, M. Aplicando principios de aprendizaxe ao tratamento das reaccións postraumaticas. Rothbaum, BO e Davis, M. Aplicando principios de aprendizaxe ao tratamento das reaccións postraumaticas.Rotbaum BO e Davis M. Aplicando principios de aprendizaxe ao tratamento de reaccións postraumáticas.Rotbaum BO e Davis M. Aplicación de principios de aprendizaxe no tratamento de reaccións postraumáticas.instalar.Colexio de Nova York.a ciencia.1008 (1), 112-121 (2003).
Rauch, SA, Eftekhari, A. & Ruzek, JI Revisión da terapia de exposición: un estándar de ouro para o tratamento do TEPT. Rauch, SA, Eftekhari, A. & Ruzek, JI Revisión da terapia de exposición: un estándar de ouro para o tratamento do TEPT.Rauch SA, Eftekhari A. e Ruzek DI Unha revisión da terapia de exposición: o tratamento estándar de ouro para o trastorno de estrés postraumático. Rauch, SA, Eftekhari, A. & Ruzek, JI 暴露疗法回顾：PTSD 治疗的黄金标准。 Rauch, SA, Eftekhari, A. & Ruzek, JI Revisión da terapia de exposición: o estándar de ouro para o tratamento do TEPT.Rauch, SA, Eftekhari, A. e Ruzek, DI Unha revisión da terapia de exposición: o tratamento estándar de ouro para o trastorno de estrés postraumático.J. Rehabilitación.desenvolvemento do encoro 49, 679–687.https://doi.org/10.1682/jrrd.2011.08.0152 (2012).
Foa, EB Terapia de longa exposición: pasado, presente e futuro.Represión da ansiedade 28, 1043–1047.https://doi.org/10.1002/da.20907 (2011).
O señor Millard et al.Causas existenciais e adquiridas de perda de memoria no trastorno de estrés postraumático: achados dun estudo de xemelgos.J. Psiquiatra.tanque de almacenamento.42 (7), 515-520 (2008).
O señor Millard et al.A base neurobiolóxica da incapacidade de recordar recordos esvaídos no trastorno de estrés postraumático.bioloxía.Psicoloxía.66 (12), 1075-1082 (2009).
Bush, DEA, Sotres-Bayon, F. & LeDoux, JE Diferenzas individuais no medo: illando a reactividade do medo e os fenotipos de recuperación do medo. Bush, DEA, Sotres-Bayon, F. & LeDoux, JE Diferenzas individuais no medo: illando a reactividade do medo e os fenotipos de recuperación do medo.Bush, DEA, Sautre-Baillon, F. e LeDoux, JE Diferenzas individuais no medo: distinguir os fenotipos de reactividade do medo e reinstalación do medo. Bush, DEA, Sotres-Bayon, F. & LeDoux, JE 恐惧的个体差异：隔离恐惧反应和恐惧恢复表型。 Bush, DEA, Sotres-Bayon, F. & LeDoux, JE Diferenzas individuais no medo: illamento da resposta ao medo e táboa de recuperación do medo.Bush, DEA, Sautre-Baillon, F. e LeDoux, JE Diferenzas individuais no medo: o illamento das respostas ao medo e o fenotipo da recuperación do medo.J. Trauma.presión 20(4), 413–422 (2007).
Russo, AS & Parsons, RG A resposta de sobresalto acústico en ratas prevé a variación interindividual na extinción do medo. Russo, AS & Parsons, RG A resposta de sobresalto acústico en ratas prevé a variación interindividual na extinción do medo.Russo, AS e Parsons, RG A resposta de sobresalto acústico en ratas prevé diferenzas individuais na extinción do medo. Russo, AS & Parsons, RG 大鼠的声学惊吓反应预测恐惧消退的个体差异。 Russo, AS & Parsons, RGRusso, AS e Parsons, RG A resposta de sobresalto acústico en ratas prevé diferenzas individuais na extinción do medo.Neurobioloxía.estudar.Memoria.139, 157–164 (2017).
Russo, AS, Lee, J. & Parsons, RG A variabilidade individual na lembranza da extinción do medo está asociada coa fosforilación da proteína quinase activada por mitógenos no córtex infralímbico. Russo, AS, Lee, J. & Parsons, RG A variabilidade individual na lembranza da extinción do medo está asociada coa fosforilación da proteína quinase activada por mitógenos no córtex infralímbico.Russo, AS, Lee, J. e Parsons, RG A variabilidade individual na extinción do recordo do medo está asociada á fosforilación da proteína quinase activada por mitógenos na cortiza infralímbica. Russo, AS, Lee, J. & Parsons, RG. Russo, AS, Lee, J. & Parsons, RG O recordo do desvanecemento do medo está relacionado coas diferenzas individuais na fosforificación periférica 美裯中丝裂原活化筒能激酶的.Russo, AS, Lee, J. e Parsons, RG As diferenzas individuais na extinción do medo durante o recordo están asociadas coa fosforilación das proteínas quinases activadas por mitógenos no córtex do membro inferior.Psicofarmacoloxía 236 (7), 2039–2048 (2019).